hk-2細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞,通過導入hpv-16 e6/e7基因而獲得永生化。將含有hpv-16 e6/e7基因的重組的逆轉錄病毒載體plxsn 16 e6/e7轉染外生包裝細胞psi-2;psi-2細胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系pa317,最后將pa317細胞產(chǎn)生的病毒顆粒導入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細胞。盡管plxsn 16 e6/e7中含有新霉素抗性,但未用g418篩選轉導克隆。southern和fish分析顯示,hk-2細胞來源于單克隆。pcr檢測證實,hk-2細胞基因組中含有e6/e7基因。hk-2細胞保留了指示分化良好的ptcs的表型,細胞堿性磷酸酶、γ-谷氨酰轉肽酶、亮氨酸氨基肽酶、酸性磷酸酶、細胞角蛋白、α3、β1整合素和纖維連接蛋白呈陽性,因子viii相關抗原、6.19抗原和calla內(nèi)肽酶呈陰性。hk-2細胞還保留了近端腎小管上皮的功能特征,如na+依賴性/根皮苷敏感性糖轉運和腺苷酸環(huán)化酶對甲狀旁腺的反應性,但對抗利尿激素的反應性。hk-2細胞能夠進行糖異生,其制造和儲存糖原的能力證明了這一點。hk-2細胞是貼壁依賴性的,不會在甲基纖維素、軟瓊脂或懸
更新時間:2025-07-07