hk-2細(xì)胞屬源于正常腎的近曲小管細(xì)胞,通過導(dǎo)入hpv-16 e6/e7基因而獲得永生化。將含有hpv-16 e6/e7基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體plxsn 16 e6/e7轉(zhuǎn)染外生包裝細(xì)胞psi-2;psi-2細(xì)胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細(xì)胞系pa317,最后將pa317細(xì)胞產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細(xì)胞。盡管plxsn 16 e6/e7中含有新霉素抗性,但未用g418篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。southern和fish分析顯示,hk-2細(xì)胞來源于單克隆。pcr檢測證實(shí),hk-2細(xì)胞基因組中含有e6/e7基因。hk-2細(xì)胞保留了指示分化良好的ptcs的表型,細(xì)胞堿性磷酸酶、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、亮氨酸氨基肽酶、酸性磷酸酶、細(xì)胞角蛋白、α3、β1整合素和纖維連接蛋白呈陽性,因子viii相關(guān)抗原、6.19抗原和calla內(nèi)肽酶呈陰性。hk-2細(xì)胞還保留了近端腎小管上皮的功能特征,如na+依賴性/根皮苷敏感性糖轉(zhuǎn)運(yùn)和腺苷酸環(huán)化酶對甲狀旁腺的反應(yīng)性,但對抗利尿激素的反應(yīng)性。hk-2細(xì)胞能夠進(jìn)行糖異生,其制造和儲存糖原的能力證明了這一點(diǎn)。hk-2細(xì)胞是貼壁依賴性的,不會在甲基纖維素、軟瓊脂或懸
更新時間:2025-07-07